在分子实验室中减少污染的10种方法

在这里，我们讨论了控制或最小化分子实验室污染的十种方法。实验室家具实验室按归属可分为三类：第一类是从属于大学或者是由大学代管的实验室；第二类实验室属于国家机构，有的甚至是国际机构；第三类实验室直接归属于工业企业部门，为工业技术的开发与研究服务。实验台对于生物、医药、涂料实验室及洁净间而言，彻底的清洁和消毒是首先要考虑的功能，这就要求实验室家具具有易清洁，消毒并能够较长时间保持洁净的特点。而普通的钢制和木制家具则很难满足这种洁净度的要求。实验中央台可做岛形，四周都有走道便于工作人员活动并可以快速接近紧急设备或出口，当实验室两侧或两端有确定的出口时可采用半岛形实验台，而单间实验室通常采用靠墙实验台在中间留通道。内凹形工作台让工作人员长时间工作也会舒适，采用此方案，他们工作时可以使脚放在地上或脚位上以保持平衡，挺直身体，同时，人坐在内凹形实验台边，也可以为实验室留出更大的活动空间。

1.实验室建设

污染的预防始于构建或建立PCR实验室。PCR检测应至少指定两个区域：PCR前和PCR后。应指定一个房间或区域进行预PCR。理想情况下，该房间应进一步分为两个区域：制备PCR主混合物和添加样品制备/主混合物。

通过使用死空气罐（DAB）用UV光，可以与样品中加入单独制备主混合物。 DAB具有以制备主混合物所需的特殊消耗品和小型设备（离心，涡流管，移液管，提示和管）。

样品制备可涉及手动或自动提取。样品制备所需的消耗品和小型设备(小型离心机，涡流管，移液器，吸头和管等)可以放在台式，另一个DAB或生物安全柜(BSC)中，具体取决于您正在使用的样品。该区域还可用于将样品添加到PCR主混合物中。

应该有用于存储盒的专用冰箱/冷冻器,另一个用于存储样品。

我们应当建立第二个房间（PCR后）和扩增后一步进行分析。这个室应独立的PCR前室。腔室后是用于扩增的热循环仪和PCR后的器械的任何期望的位置处的PCR分析。理想情况下，DAB用于该区域，PCR扩增后的任何的操作的开口管所需的步骤中使用。小设备和PCR后要产生所需的消耗品接收DAB（微量离心，涡流泵，吸液管，提示和管）。

2.环境控制

这两个区域(预PCR和后PCR)应该具有独立的环境控制，而不是使用常见的管道系统进行空调。此外，两个房间都应配备气锁门。注意：如果无法为PCR前和PCR后工作建立物理屏障或单独的房间，应尽一切努力将工作区域尽可能远地设置。实验室技术人员应将这两个工作区视为处于不同的房间。应注意在每个区域佩戴不同的个人防护装备(PPE)。

3.单向工作流程

在预PCRPCR之后，分子实验室的工作流程只应朝着一个方向继续进行。PCR主要混合试剂和可能含有PCR模板的样品只能在PCR预室中制备。

经受在含有扩增子后室（所述模板的扩增）管PCR扩增，以及前不应该被打开或引入在任何情况下PCR室。扩增子为模板，进行PCR反应的将来，很容易PCR污染或样品制备试剂，消耗品或设备。

这意味着，在未经彻底净化的情况下，引入PCR后室的消耗品和PPE(实验室外套，手套，护目镜等)不应放回PCR前室。

当从一个房间移动到另一个房间时，实验室技术人员必须记住更换PPE。理想的是，后PCR操作的技术人员不应该返回到预PCR进行工作。如果必须违反单向工作流，则应小心更换PPE。